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        技術支持

        細胞傳代方法




        一、貼壁細胞傳代


        1.提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內。


        2.吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞。


        3.加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用。


        4.用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產生大量的氣泡。


        5.將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。


        二、懸浮細胞傳代


        1.將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min。


        2.棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液。


        3.將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。






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