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        如何保證CO2培養箱正常運轉


           哺乳動物細胞的培養無疑是生物學研究中最重要的一環。哺乳動物細胞相對嬌貴,需要特殊的培養環境。這一環境主要是由CO2培養箱來提供的。讓你的CO2培養箱正常運作,遠離污染,對細胞的成功培養尤為重要。以下建議來自Eppendorf的產品經理Charlie Villano。
        避免污染
             哺乳動物細胞是在營養豐富的培養基中培養的,并且培養溫度有利于幾乎所有微生物的生長。盡管許多研究人員在培養基中加入抗生素或抗菌素,作為預防措施,但這并不能解決方法上的錯誤,反而掩蓋了潛在的問題。如果可能的話,避免使用這些抗生素,不斷改善你的無菌技術,來保持你的培養箱干凈。
            微生物通常是“破門而入”。這雖然是顯而易見的,但要完全避免,也沒那么容易。在培養箱中放置東西時,一定要戴上手套,并盡量減少內層玻璃門打開的時間。經常用75%的乙醇擦拭門把手。保持濕度盤中的水清潔,每周更換。定期用肥皂和水清洗濕度盤,并用乙醇擦拭,或高壓滅菌。如果培養基灑在了培養箱內,應取出層架徹底清潔。
           清洗工作的頻率取決于你的培養箱使用得有多頻繁。在大型實驗室,培養箱需要經常清洗。如果你剛開始用一個干凈的培養箱,又處處小心,那么它可在幾周或幾個月內保持干凈。
        保證CO2的水平
            大多數哺乳動物培養基使用碳酸氫鹽緩沖系統。CO2是這一系統中的重要組成部分,必須保持在5%,以維持培養基的生理pH。盡管幾乎所有的培養箱都配備CO2傳感器,但隨著時間的推移,校準會偏離設定點,需要操作人員直接測定CO2來重新校準。測定CO2水平的最簡單、最準確方法是使用氣體分析儀,如Fyrite裝置。它們有專門測定CO2或O2水平的型號。
        舊型號的培養箱可能需要更頻繁的重新校準,而最新的型號每月會進行CO2傳感器的自動歸零。盡管這些型號幾乎不需要手動校準,但用戶也應當用Fyrite裝置來檢測培養室的CO2水平。
        維持37℃
           哺乳動物細胞也和我們一樣,喜歡37℃的溫度。大部分CO2培養箱都配有顯示器,報告內室的溫度,但定期檢查也是個不錯的主意。使用一個高品質、已校準的溫度計。將溫度計貼在玻璃門的內側,這樣可以從外面讀取溫度,而不用打開玻璃門。在前一天下班前貼上。第二天一早,讀取溫度。重復多次,如果溫度計很準的話,讀數不是37℃,那就有必要重新校準溫度傳感器。
        保持潮濕
           培養箱內部的溫度相對較高,因此在沒有高濕度的情況下培養基的蒸發將是個實際的問題。通過培養箱底部的濕度盤,可維持相對較高的濕度(90%~95%)。但缺點是,裝滿水的濕度盤也是個潛在的污染源。
            總之,定期維護和清潔是保持你的CO2培養箱正常運作并遠離污染的最有效方法。

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